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Recombinante VHH Antibodies

Nutzen Sie alle Vorteile rekombinanter VHH-Antikörper, die von dem erfahrenen Team von antibodies-online und Rockland hergestellt werden.

Wir bieten einen umfassenden Service zur Herstellung rekombinanter VHH-Antikörper an, der Antikörper für eine Vielzahl von Anwendungen erzeugt, darunter den Nachweis kryptischer Epitope, den Nachweis von Haptenen, die Bindung an das aktive Zentrum von Enzymen, diagnostische Bildgebung, Virusneutralisierung und vieles mehr.

Unsere rekombinanten VHH-Antikörper werden unter Verwendung von hyperimmunisierten Kameliden und Einzelzellselektion aus klonalem Display hergestellt, was die gewünschte Empfindlichkeit, Spezifität und Affinität gewährleistet und die Produktion in bakteriellen oder Säugetier-Expressionssystemen ermöglicht.

Vorteile von VHH-Antikörpern

Rekombinante VHH-Antikörper, auch Nanokörper genannt, sind das antigenbindende Fragment (Abb. 1: VHH-Domäne, orange) natürlich vorkommender schwerer Ketten-Antikörper (HCAbs), die von hyperimmunisierten Kameliden gebildet werden. Sie können in monomere oder multimere, multispezifische Formate umgewandelt werden, die eine hohe Zielspezifität, nanomolare Affinität und eine geringe Tendenz zur Aggregation aufweisen. Sie sind auch weniger anfällig für Probleme mit sterischen Hindernissen, die bei herkömmlichen Antikörpern auftreten können. Dadurch sind rekombinante VHH-Antikörper ideal für eine Reihe von präklinischen diagnostischen und therapeutischen Anwendungen geeignet.

VHH Antibodies

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Unser Servicepartner: Rockland

Unser Servicepartner: Rockland

Profitieren Sie von der Erfahrung aus zwei Generationen wissenschaftlicher Weiterentwicklung. Rockland ermöglicht den Nachweis von Biomolekülen, Charakterisierung und Analyse von Biomolekülen seit 1962. Auf 5.500 Quadratmetern Produktionsfläche werden hochwertige Antikörper, Reagenzien und maßgeschneiderte Dienstleistungen für Ihr nächstes Projekt hergestellt

Profitieren Sie von der Erfahrung aus zwei Generationen wissenschaftlicher Weiterentwicklung. Rockland ermöglicht den Nachweis von Biomolekülen, Charakterisierung und Analyse von Biomolekülen seit 1962. Auf 5.500 Quadratmetern Produktionsfläche werden hochwertige Antikörper, Reagenzien und maßgeschneiderte Dienstleistungen für Ihr nächstes Projekt hergestellt

Unser Verfahren zur Herstellung rekombinanter VHH-Antikörper

Die Herstellung rekombinanter VHH-Antikörper ist in der Regel ein 8-monatiger Prozess, der die Antigenvorbereitung, die Immunisierung von Kameliden, den Aufbau einer Bibliothek, das Biopanning und die Klonisolierung, die Klonvalidierung und die VHH-Antikörperproduktion umfasst.

Antigen Preparation

Vor dem 1. Monat

Wir können eine Reihe von Makromolekülen als Antigene verwenden - sofern sie unter BSL-2-Bedingungen eingesetzt werden können -, z. B. rekombinante oder gereinigte Proteine, synthetische Peptide, modifizierte Peptide, Haptene, ganze Zelllysate, Nukleinsäuren, Lipide und Kohlenhydratkomplexe.

Kameliden Immunisierung

Monat 2

Wir generieren VHH-Antikörper sowohl bei Lamas als auch bei Alpakas unter Verwendung des von Ihnen angegebenen Immunisierungsplans und standardmäßiger oder maßgeschneiderter Adjuvantien. Aufgrund unserer jahrzehntelangen Erfahrung und der Überwachung der antikörpervermittelten Immunreaktion (Antiseren-Titration) können wir vor der Erstellung der Bibliothek Empfehlungen aussprechen.

VHH Library Erstellung

Monat 3

Nach der Bestätigung einer zufriedenstellenden Immunantwort erzeugen wir eine Hefe-Display-Bibliothek, die das gesamte Repertoire der natürlich zirkulierenden, antigenbindenden VHH-Antikörper repräsentiert. Um sicherzustellen, dass die gewünschten Bindungseigenschaften in der Bibliothek gefunden werden können, analysieren wir kritische Parameter wie Größe und Diversität.

Biopanning & Isolierung des Klons

Monat 4-5

Um Klone zu isolieren, die an das gewünschte Antigen binden, verwenden wir proprietäre Affinitätsselektionstechnologien, die wir in jahrzehntelangen erfolgreichen Projekten entwickelt haben.

Rekombinante VHH Antikörper Validierung

Monat 6-7

Die Validierung der isolierten Einzelklone erfolgt durch Fit-for-Purpose-Studien, die die Charakterisierung der Spezifität (Bindung an das beabsichtigte Ziel) und der Kreuzreaktivität (Bindung an nicht verwandte Antigene) unter den für die jeweiligen Anwendungen relevanten Bedingungen umfassen. Wir können auch weitere kundenspezifische Validierungen zur Bestimmung der Affinität, zur Identifizierung von Antikörperpaaren und mehr durchführen.

Rekombinante VHH Antikörper Produktion

Monat 8

Nach der Validierung werden die Klone in einem bakteriellen System in der gewünschten Größenordnung exprimiert und anschließend in einer für Bindungs- und Funktionsstudien geeigneten Konzentration gereinigt.

Wir können auch rekombinante VHH-Antikörper in eukaryotischen Systemen für kundenspezifische Antikörperformate und/oder Anwendungen exprimieren und bei Bedarf kundenspezifische Signalsequenzen oder N- oder C-terminale Tags verwenden.

Verwendung rekombinanter VHH-Antikörper

Unsere rekombinanten VHH-Antikörper können leicht in multispezifische und multivalente Formate sowie in genetische Fusionen mit Effektor-Domänen (z. B. Fc), Enzymen und mehr gebracht werden.

VHH Flow Cytometry
Abbildung 2. Durchflusszytometrische Analyse der rekombinanten EGFR x DIG biospezifischen Antikörper (BsAb44 und BsAb45), die an EGFR-positive A431-Zellen oder EGFR-negative HEK293T-Zellen binden. BsAbs wurden mit Fluoreszenz-konjugiertem Streptavidin nach Inkubation mit biotinyliertem DIG oder direkt mit einem Fluoreszenz-konjugierten Anti-His-Antikörper nachgewiesen.
VHH Kinetic
Abbildung 3. Kinetische Analyse der Sensogramme, die aus der Bindung des EGFR x DIGrekombinanten biospezifischen VHH-Antikörpers (BsAb 45) an den EGFR erstellt wurden.
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